无标记蛋白自发荧光关联光谱的紫外光稳定性提升
化学物理
2020-02-25 v1 生物物理
摘要
蛋白质自发荧光的光稳定性差与亮度低一直是阻碍在单分子水平检测无标记蛋白的主要限制因素。为克服这些问题，我们在此报告一种提升蛋白质光稳定性的策略，并利用其在紫外（UV）区的天然色氨酸自发荧光进行荧光关联光谱（FCS）。将酶促除氧剂与抗氧化剂和三重态猝灭剂结合，大幅提升了蛋白质光稳定性，降低了光漂白概率，并提高了净自发荧光检测速率。我们的结果表明，最初为有机可见荧光染料推导的光化学基本概念具有相当的普适性。利用该方法，我们实现了对仅含 24 个色氨酸残基的无标记链霉亲和素蛋白的 UV 荧光关联光谱检测，比当前最优水平少 6.5 倍。该策略极大拓展了利用单分子荧光通用性检测单一无标记蛋白的可能性，且无需可能存在干扰的外源荧光标记。它也为提升有机器件的 UV 耐久性开辟了新前景。
引用
@article{arxiv.2002.09761,
title = {Ultraviolet Photostability Improvement for Autofluorescence Correlation Spectroscopy on Label-Free Proteins},
author = {Aleksandr Barulin and Jérôme Wenger},
journal= {arXiv preprint arXiv:2002.09761},
year = {2020}
}