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从偏振荧光数据计算不同结合模式对奎纳克林-DNA 复合物形成的贡献

生物物理 2015-02-05 v2 生物大分子

摘要

采用吸收光谱和偏振荧光光谱方法研究了吖啶衍生物奎纳克林 (QA) 与鸡红细胞 DNA 的结合。测量在具有不同染料浓度(QA 浓度范围从 10^{-6} 至 10^{-4} M)和离子强度(Na^{+} 浓度范围从 10^{-3} 至 0.15 M)的水性缓冲溶液(pH 6.9)中,在宽范围的磷酸根与染料摩尔比(P/D)下进行。已确定,以相对荧光强度对 P/D 作图绘制的荧光滴定曲线的最小值,是由 QA 与 DNA 的两种具有不同发射参数的结合类型之间的竞争所决定的:(i) 在高 P/D 值下占主导的嵌入结合,以及 (ii) 在低 P/D 值下占主导的外部静电结合,后者伴随着 DNA 骨架上非荧光染料缔合物的形成。确定了所形成复合物的吸收和荧光特性。提出了根据不同 P/D 值计算不同结合模式对复合物形成贡献的方法。研究表明,在静电相互作用情况下,以每个结合的 QA 分子对应的 DNA 碱基对数衡量的结合位点大小,比嵌入结合的小 8 倍,这决定了外部结合相对于更强的嵌入结合模式的竞争能力。

关键词

引用

@article{arxiv.1311.6362,
  title  = {Calculating the contribution of different binding modes to Quinacrine - DNA complex formation from polarized fluorescence data},
  author = {Igor Voloshin and Olga Ryazanova and Victor Karachevtsev and Victor Zozulya},
  journal= {arXiv preprint arXiv:1311.6362},
  year   = {2015}
}

备注

10 pages, 7 figures