同步无串扰的相关联 AFM 与共聚焦显微术/光谱术
生物物理
2020-05-19 v2 仪器与探测器
生物大分子
摘要
显微术已成为我们观察生物系统与组装体的表征工具支柱。不同显微术的相关联与同步使用依赖于图像采集期间无干扰的基本假设。本工作中，通过探索原子力显微镜与共聚焦荧光寿命成像显微术（AFM-FLIM）的相关联使用，我们量化了同步采集期间发生的串扰效应。我们表征并最小化了作用于不同 AFM 悬臂、干扰正常 AFM 操作的光机械力，以及来自针尖与悬臂、影响时间分辨荧光检测的杂散发光。通过定义非干扰实验成像参数，我们展示了相互作用力、荧光寿命与强度的准确实时采集与二维映射，表征了支撑脂质模型膜的凝胶与流体相分离的形态（AFM）与局域黏度（FLIM）。最后，作为原理证明，借助同步力与荧光光谱术，我们通过控制荧光纳米金刚石置于 AFM 针尖上时距金属表面的距离，精确调控其寿命。这开辟了一条淬灭传感的新途径，用于成像软生物样品如膜，因为与传统液体 AFM 不同，它不需要针尖-样品机械接触。
引用
@article{arxiv.2001.02554,
title = {Synchronous, Crosstalk-free Correlative AFM and Confocal Microscopies/Spectroscopies},
author = {Thales F. D. Fernandes and Oscar Saavedra and Emmanuel Margeat and Pierre-Emmanuel Milhiet and Luca Costa},
journal= {arXiv preprint arXiv:2001.02554},
year = {2020}
}