通过共聚焦荧光寿命单分子定位显微镜实现超分辨 FRET 成像
光学
2022-11-29 v1 生物物理
摘要
基于 FRET 的方法是传感（生物）分子直接环境和相互作用的独特工具。FRET 成像和 FLIM（荧光寿命成像显微镜）能够可视化分子相互作用和功能状态的空间分布。然而，传统的 FLIM 和 FRET 成像提供的是衍射极限体积内分子系综的平均信息，这限制了观测信号的空间信息、准确性和动态范围。在此，我们展示了一种基于单分子定位显微镜获得超分辨 FRET 成像的方法，该方法使用了商用时间分辨共聚焦显微镜的早期原型。带有荧光探针的 DNA 纳米级形貌成像点积累（DNA-PAINT）提供了合适的背景降低和闪烁动力学组合，与常规共聚焦显微镜的扫描速度兼容。使用单激光器激发供体，采用宽带检测带以同时获取供体和受体的发射，并通过寿命信息检测 FRET 事件。
引用
@article{arxiv.2211.15332,
title = {Super-resolved FRET imaging by confocal fluorescence-lifetime single-molecule localization microscopy},
author = {Cecilia Zaza and Germán Chiarelli and Ludovit P. Zweifel and Mauricio Pilo-Pais and Evangelos Sisamakis and Fabio Barachati and Fernando D. Stefani and Guillermo P. Acuna},
journal= {arXiv preprint arXiv:2211.15332},
year = {2022}
}