自由扩散阿托升液滴中的单分子敏感 FRET
生物物理
2015-05-21 v3
摘要
本文仔细比较了限制在自由扩散的阿托升（attoliter）体积水相液滴中的单个染料标记 RNA 分子的荧光共振能量转移（FRET）与溶液中未受限 RNA 的 FRET。使用自由扩散液滴是一种极其简单且高通量的技术，可显著提高单分子对 FRET 测量的信噪比。我们发现溶液中和液滴中的 FRET 可能存在显著差异，主要归因于限制环境中 pH 值的改变。我们还证明，足够浓度的非离子表面活性剂可以减轻这种效应，并将 FRET 恢复至其中性 pH 溶液值。在低表面活性剂水平下，即使考虑了 pH 值，我们仍观察到溶液中和液滴中 FRET 值分布之间存在差异，目前尚无法解释。我们的结果将促进纳米乳液液滴作为阿托升体积反应器在生物物理和生化分析中的应用，同时也适用于蛋白质结晶或纳米颗粒合成等需要密切关注限制相 pH 值的应用场景。
引用
@article{arxiv.1312.0854,
title = {Single-Molecule-Sensitive FRET in Freely-Diffusing Attoliter Droplets},
author = {Sheema Rahmanseresht and Peker Milas and Kieran P. Ramos and Ben D. Gamari and Lori S. Goldner},
journal= {arXiv preprint arXiv:1312.0854},
year = {2015}
}
备注
Twenty-three pages, 3 figures, one table, plus supporting information with additional figures and tables