在零模波导中将单分子福斯特共振能量转移(FRET)范围拓展至 10 纳米以上
光学
2019-07-09 v1 生物物理
化学物理
摘要
单分子福斯特共振能量转移(smFRET)被广泛用于监测分子水平的构象与相互作用动力学。然而,常规 smFRET 测量在供体-受体距离超过 10 nm 时无效,阻碍了对更大尺寸生物分子的研究。在此,我们展示零模波导(ZMW)孔径可用于克服 smFRET 中的 10 nm 屏障。利用优化的 ZMW 结构,我们展示了标准商用荧光团之间最远达 13.6 nm 距离的 smFRET,且 FRET 效率显著提升。为进一步突破经典 FRET 范围极限,将 ZMW 与带有多个受体染料的分子构建体相结合,以实现高 FRET 效率与高荧光计数率。由于我们讨论了 ZMW 内定量 smFRET 测量的通用准则,该技术可轻易应用于以增强亮度监测大型分子复合物的构象与相互作用。
引用
@article{arxiv.1907.03734,
title = {Extending Single Molecule F\"orster Resonance Energy Transfer (FRET) Range Beyond 10 Nanometers in Zero-Mode Waveguides},
author = {Mikhail Baibakov and Satyajit Patra and Jean-Benoît Claude and Antonin Moreau and Julien Lumeau and Jérôme Wenger},
journal= {arXiv preprint arXiv:1907.03734},
year = {2019}
}