四聚体UvrD解旋酶因频繁复制受阻而定位于大肠杆菌复制体
生物大分子
2021-02-23 v1
摘要
所有生物中的DNA复制都必须克服核蛋白阻塞以完成基因组复制。大肠杆菌中的辅助复制解旋酶Rep与UvrD通过移除 incoming 核蛋白复合物或协助复制重启来帮助复制 machinery 克服阻塞。近期活细胞研究已揭示Rep功能的机制细节,但UvrD在体内的活性仍不清楚。在此,通过整合生化分析与超分辨单分子荧光显微镜,我们发现UvrD自缔合为四聚体,且与Rep不同,尽管其出现在约80%的复制叉处,却不被招募至特定复制体蛋白。通过删除rep及DNA修复因子mutS与uvrA、突变RNA聚合酶扰动转录以及抗生素抑制,我们表明UvrD在复制叉处的存在依赖于其活性。这很可能由包括RNA聚合酶在内的DNA结合蛋白及DNA损伤所导致的极高复制受阻频率所介导。UvrD通过不同于Rep的明确机制被招募至核蛋白阻塞位点,因此在保障成功DNA复制中发挥着比先前所认识更重要且互补的作用。
引用
@article{arxiv.2102.11266,
title = {Tetrameric UvrD helicase is located at the E. coli replisome due to frequent replication blocks},
author = {Adam J. M Wollman and Aisha H. Syeda and Andrew Leech and Colin Guy and Peter McGlynn and Michelle Hawkins and Mark C. Leake},
journal= {arXiv preprint arXiv:2102.11266},
year = {2021}
}