利用差分动态显微镜进行蛋白质粒径测定
软凝聚态物质
2023-10-05 v1
摘要
动态光散射在五十多年前引入，常规用于确定胶体悬浮液以及溶液中大分子（如蛋白质、核酸及其复合物）的尺寸分布。近年来，差分动态显微镜被提出作为一种用显微镜进行动态光散射实验的方法，其对光学表面清洁度的限制远不那么严格，但由于使用基于相机的探测器，潜在灵敏度较低。在本工作中，我们将明场差分动态显微镜推向已知极限之外，并证明其足够灵敏以测定稀释溶液中微小大分子的尺寸。通过考虑三种不同蛋白质（牛血清白蛋白、溶菌酶和胃蛋白酶）的溶液，我们准确测定了单个蛋白质及小蛋白质聚集体的扩散系数和流体动力学半径，低至每毫升几毫克的浓度。此外，我们呈现初步结果，展示测定维里系数的未探索潜力。我们的结果与并行使用最先进商用动态光散射装置所获得的结果极为一致，表明差分动态显微镜代表了一种用光学显微镜进行快速、无标记蛋白质粒径测定的有价值替代方案。
引用
@article{arxiv.2307.12608,
title = {Protein sizing with Differential Dynamic Microscopy},
author = {Chiara Guidolin and Christopher Heim and Nathan B P Adams and Philipp Baaske and Valeria Rondelli and Roberto Cerbino and Fabio Giavazzi},
journal= {arXiv preprint arXiv:2307.12608},
year = {2023}
}