用于多功能TIRF显微术与纳米显微术的透明波导芯片
应用物理
2021-12-28 v2 生物物理
光学
摘要
全内反射荧光显微镜（TIRF）由于倏逝光场对样品的浅穿透深度，实现了对细胞表面和其他薄样品的低背景、活细胞友好型成像。在光波导芯片上实现TIRF（c-TIRF）克服了与基于透镜的TIRF相比在放大倍率和视场（FOV）方面的历史限制，并进一步允许光以复杂图案引导，可用于高级成像技术或对样品进行选择性刺激。然而，芯片本身的不透明性迄今为止阻碍了它们在倒置显微镜上的使用，并使样品制备和处理变得复杂。在这项工作中，我们引入了一种基于透明基底的新型c-TIRF成像平台，该平台与标准#1.5玻璃盖玻片常用的样品处理和成像程序完全兼容，并使用标准互补金属氧化物半导体（CMOS）技术制造，可以轻松扩大规模进行大规模生产。我们使用正置和倒置显微镜在合成和生物样品上展示了其性能，并展示了如何将其扩展到超分辨率应用，利用超分辨率径向涨落（SRRF）技术实现了116纳米的分辨率。这些新型芯片保留了不透明芯片基TIRF的可扩展视场和TIRF的高轴向分辨率，并具有与许多不同物镜、显微镜方法和处理技术一起使用的多功能性。因此，我们认为c-TIRF是一项已准备好被广泛采用的技术，它既增加了TIRF对用户的可及性，也扩大了可从中受益的应用范围。
引用
@article{arxiv.2006.07275,
title = {A transparent waveguide chip for versatile TIRF-based microscopy and nanoscopy},
author = {Anish Priyadarshi and Firehun Tsige Dullo and Deanna L. Wolfson and Azeem Ahmad and Nikhil Jayakumar and Vishesh Dubey and Jean-Claude Tinguely and Balpreet Singh Ahluwalia and Ganapathy Senthil Murugan},
journal= {arXiv preprint arXiv:2006.07275},
year = {2021}
}