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通过光开关蛋白定量分析揭示自然杀伤细胞受体的动力学

细胞行为 2015-06-17 v1 生物物理

摘要

自然杀伤 (NK) 细胞的激活由众多在免疫突触处积累的激活性和抑制性表面受体动态调节。依赖于光漂白后荧光恢复等间接测量的方法限制了受体动力学的定量分析。在此,我们报告了一种研究蛋白质如何往返于免疫突触的新方法,该方法使用标记了光开关荧光蛋白 tdEosFP 的 NK 细胞受体,该蛋白可通过紫外光不可逆地从绿色荧光状态切换至红色荧光状态。因此,在局部切换事件之后,通过监测两个感兴趣区域的荧光,可以在时间和空间上解析光开关分子的运动。通过将图像与数学模型进行比较,我们评估了受体 KIR2DL1 的扩散系数(0.23±0.06 μm2/s0.23 \pm 0.06\ \mu m^2/s),并评估了突触形成如何影响受体动力学。我们的数据得出结论:抑制性 NK 细胞受体 KIR2DL1 持续被运输到突触中,并在那里保持惊人的稳定性。然而出乎意料的是,在 NK 细胞同时与多个靶细胞形成突触的情况下,一个突触处的 KIR2DL1 可以重新定位到另一个突触。因此,我们的结果揭示了一种先前未被检测到的突触间蛋白质交换。

关键词

引用

@article{arxiv.1310.2415,
  title  = {Dynamics of Natural Killer cell receptor revealed by quantitative analysis of photoswitchable protein},
  author = {Sophie V. Pageon and Gerardo Aquino and Kathryn Lagrue and Karsten Köhler and Robert G. Endres and Daniel M. Davis},
  journal= {arXiv preprint arXiv:1310.2415},
  year   = {2015}
}

备注

25 pages, 5 figures