用于金纳米颗粒配体定量的相关消光与单荧光团光漂白显微镜
光学
2023-10-10 v1 介观与纳米尺度物理
定量方法
摘要
纳米颗粒（NPs）是有前景的治疗递送载体，但日益明确的是，NP上细胞结合配体的数量与呈递方式会影响治疗的最终命运。每当NP与生物分子偶联时，都会产生异质性的修饰NP群体，而需要对颗粒-配体结构的亚群细节进行表征，才能可靠地解释基于NP的数据。我们报道了一种光学显微镜方法，用于在由与人全转铁蛋白（以Alexa647标记荧光，Tf）修饰的金NP（GNPs）组成的样品中，在单颗粒基础上定量评估偶联情况。我们对稀疏沉积于玻璃表面的NP-配体构建体使用了宽场荧光与消光显微镜，并结合相关分析将衍射极限的荧光源与单个GNP的光学消光在空间上共定位。采用对荧光发射的光漂白步进分析来估计贡献于所检测发射速率的荧光团数量。该方法量化了每个GNP附着的荧光生物分子数量、混合群体中未偶联GNP与未结合Tf的数量，以及偶联GNP的尺寸与颗粒内聚集倾向。在单颗粒水平分析时，我们发现GNP群体中每个GNP的Tf配体数量具有高度变异性，揭示出在系综平均方法中无法获取的非平凡统计分布。
引用
@article{arxiv.2210.00942,
title = {Correlative extinction and single fluorophore bleaching microscopy for ligand quantification on gold nanoparticles},
author = {Nicole Slesiona and Lukas Payne and Iestyn Pope and Paola Borri and Wolfgang Langbein and Peter Watson},
journal= {arXiv preprint arXiv:2210.00942},
year = {2023}
}