参与天蓝色链霉菌中放线紫红素生物合成的依赖黄素双组分单加氧酶
生物大分子
2015-01-08 v1
摘要
依赖黄素的双组分单加氧酶属于微生物中许多代谢和生物合成途径中参与氧化反应的一类新兴酶。一个组分是 NAD(P)H:黄素氧化还原酶，它为第二个组分（真正的单加氧酶）提供还原型黄素。在那里，还原型黄素激活分子氧以氧化底物。在此，我们研究了黄素还原酶 ActVB 和 ActVA-ORF5 基因产物，二者均据报道参与天蓝色链霉菌中天然抗生素放线紫红素生物合成的最后一步。我们首次表明 ActVA-ORF5 是一种依赖 FMN 的单加氧酶，其在黄素还原酶 ActVB 的帮助下催化氧化反应。我们研究了还原型 FMN 在 ActVB 和 ActVA-ORF5 之间转移的机制。已测定氧化型和还原型黄素（FMNox 和 FMNred）相对于 ActVB 和 ActVA-ORF5 的解离常数值。数据清楚地证明了 FMNred 从 ActVB 到 ActVA-ORF5 的热力学转移，不涉及两个蛋白质组分之间的特定相互作用。与这些数据完全一致，我们提出了一种反应机制，其中 FMNox 结合到 ActVB，在那里被还原，产生的 FMNred 移动到 ActVA-ORF5，在那里与 O2 反应生成果过氧化物中间体。报道了在 ActVA-ORF5 内形成此类物种的直接光谱证据。
引用
@article{arxiv.1501.01469,
title = {A two-component flavin-dependent monooxygenase involved in actinorhodin biosynthesis in Streptomyces coelicolor},
author = {Julien Valton and Laurent Filisetti and Marc Fontecave and Vincent Nivière},
journal= {arXiv preprint arXiv:1501.01469},
year = {2015}
}