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活细胞中胰岛素颗粒的快照式三维追踪

光学 2018-02-15 v1 生物物理

摘要

快速而准确的体积成像仍然是一项挑战,但有可能增进对细胞功能的理解。我们开发并使用了多焦点显微镜(MFM)进行三维快照成像,以实现 MIN6 细胞中经 mCherry 标记的胰岛素颗粒的三维追踪。MFM 采用特殊的衍射光学元件(DOE)同时成像多个焦平面。这种信息的同步获取以仅受阵列探测器帧率限制的速度确定单物体的三维位置。我们用荧光微球验证了 MFM 成像与追踪的准确性;单荧光微球的三维位置和轨迹可在宽广的时空尺度范围内被准确确定。利用结合三维去卷积、位移校正以及最终使用 Imaris 软件包进行追踪的图像处理,我们确定了 3.2 微米深体积内单胰岛素颗粒的三维位置和轨迹。我们发现颗粒的运动是超扩散的,但在盖玻片表面生长的细胞上,三维中的超扩散程度低于二维,表明细胞骨架(例如微管和肌动蛋白)存在各向异性。

关键词

引用

@article{arxiv.1802.05225,
  title  = {Snapshot 3D tracking of insulin granules in live cells},
  author = {Xiaolei Wang and Xiang Huang and Itay Gdor and Matthew Daddysman and Hannah Yi and Alan Selewa and Theresa Haunold and Norbert Scherer},
  journal= {arXiv preprint arXiv:1802.05225},
  year   = {2018}
}