树突棘中 Na,K-ATPase 亚型的纳米尺度解析
生物物理
2013-09-26 v1 神经元与认知
亚细胞过程
摘要
神经元突触的尺寸表明，为了彻底研究蛋白质分布和相互作用，光学超分辨成像方法是必要的。神经元样本的纳米级评估曾面临实际障碍，但不断进步的方法使得突触蛋白质拓扑结构和定量测量成为可能。这项工作探讨了应用光激活定位显微镜 (PALM) 点状超分辨成像技术，研究成熟神经元中膜结合钠泵 Na,K-ATPase 的情况。利用与 PALM 兼容的荧光蛋白 PAGFP 和 mEos，在培养神经元中研究了钠泵的两种亚型（ATP1a1 和 ATP1a3）。纳米成像揭示了树突棘中钠泵的分隔分布。通常在棘头部发现几个泵的纳米团簇，而在棘颈部相对较少。通过对检测到的单分子进行定量，估计棘头部的钠泵密度为 600-800 个泵拷贝/m。我们利用 PALM 解析了成熟培养神经元中的纳米级定位，并证明了使用 PAGFP 和 mEos 获得的拓扑结构和定量估计相似。钠泵的 PALM 拓扑评估与之前的 STED 研究相似，尽管定量估计存在显著差异，这表明样本标记策略和纳米成像方法的选择是正确量化的关键因素。
引用
@article{arxiv.1309.6444,
title = {Nanoscale elucidation of Na,K-ATPase isoforms in dendritic spines},
author = {Thomas Liebmann and Hans Blom and Anita Aperia and Hjalmar Brismar},
journal= {arXiv preprint arXiv:1309.6444},
year = {2013}
}