基于无标记干涉反射显微镜成像的体外微管动力学与切断重建
定量方法
2021-07-06 v1
摘要
微管细胞骨架的动态架构对细胞分裂、运动和形态发生至关重要。微管的动态特性——生长、收缩、成核和切断——受大量微管相关蛋白（MAPs）调控。这些 MAPs 的许多活性已通过显微镜检测在体外重建。作为荧光显微镜的替代，干涉反射显微镜（IRM）作为一种易用、宽场成像技术被引入，可实现微管的高对比度、高速无标记可视化。IRM 规避了荧光显微镜的若干相关问题，包括荧光标记所需的高浓度微管蛋白、荧光基团可能引起功能扰动以及光损伤风险。IRM 可在标准落射荧光显微镜上低成本实现，并可与全内反射荧光（TIRF）显微镜等荧光技术结合。本文我们描述了利用 IRM 成像微管动力学与切断的实验流程，提供解决可能实验障碍的实用技巧与指南。
引用
@article{arxiv.2107.01501,
title = {In vitro reconstitution of microtubule dynamics and severing imaged by label-free interference reflection microscopy},
author = {Yin-wei Kuo and Jonathon Howard},
journal= {arXiv preprint arXiv:2107.01501},
year = {2021}
}
备注
31 pages, 3 figures; to be published in Methods in Molecular Biology