激发光偏振对双光子光片显微镜中荧光发射的影响
生物物理
2020-07-28 v2 光学
定量方法
摘要
光片显微镜（LSM）是一种利用垂直于探测轴的平面照明进行成像的强大技术。双光子（2P）LSM 是 LSM 的一种变体，利用 2P 吸收效应对样品进行激发。光偏振态在 2P 吸收过程中起着显著且常被忽视的作用。本工作的范围是测试使用不同偏振态的激发光是否会影响具有空间无序染料群体的典型生物样品在 2P LSM 成像中检测到的信号水平。在理论模型的支持下，我们比较了使用不同偏振态与各种荧光团（荧光素、EGFP 和 GCaMP6s）及不同样品（液体溶液、固定或活体斑马鱼幼虫）所获得的荧光信号。在所有条件下，与我们的理论预期一致，平行于探测平面的线偏振提供了最大的信号水平，而垂直取向的偏振对生物样品给出低荧光信号，但对荧光素溶液给出大信号。最后，圆偏振通常提供较低的信号水平。这些结果凸显了在生物样品的 2P LSM 中控制光偏振态的重要性。此外，该表征可作为在需要信号水平最大化（例如高速 2P LSM）时选择最佳光偏振态的有用指南。
引用
@article{arxiv.2003.09496,
title = {Effects of excitation light polarization on fluorescence emission in two-photon light-sheet microscopy},
author = {Giuseppe de Vito and Pietro Ricci and Lapo Turrini and Vladislav Gavryusev and Caroline Müllenbroich and Natascia Tiso and Francesco Vanzi and Ludovico Silvestri and Francesco Saverio Pavone},
journal= {arXiv preprint arXiv:2003.09496},
year = {2020}
}
备注
16 pages, 4 figures. Version of the manuscript accepted for publication on Biomedical Optics Express