用于哺乳动物细胞中亚细胞蛋白质组装体识别的靶向纳米金刚石
生物物理
2017-11-07 v1
摘要
透射电子显微镜（TEM）可用于成功测定蛋白质的结构。然而，此类研究通常是在将蛋白质从细胞环境中提取后于体外进行的。在此，我们描述了一种将纳米金刚石用作生物 TEM 中靶向强度衬度标签的应用，以核孔复合体（NPC）作为宏观组装体模型。我们证明，使用麦芽三糖偶联的聚丙烯亚胺树枝状大分子将抗体偶联的纳米金刚石递送至活哺乳动物细胞，可实现纳米金刚石在预期细胞靶标处的高效定位。我们进一步确定了纳米金刚石在 TEM 下的特征信号，从而能够在树脂包埋、OsO4 染色的环境中明确识别单个纳米金刚石。这是首次证明纳米金刚石可作为基于 TEM 纳米尺度识别亚细胞蛋白质组装体的标签。这些结果，结合纳米金刚石独特的荧光特性与生物相容性，代表了向将纳米金刚石用作相关光学/电子生物成像标记物迈出的重要一步。
引用
@article{arxiv.1711.01551,
title = {Targeted Nanodiamonds for Identification of Subcellular Protein Assemblies in Mammalian Cells},
author = {Michael P. Lake and Louis-S. Bouchard},
journal= {arXiv preprint arXiv:1711.01551},
year = {2017}
}
备注
38 pages, 6 figures, SI section with 3 figures