用于全玻片多平面、多光谱与相位成像的双 LED 多通道显微镜

我们报道了一种用于全玻片多平面、多光谱与相位成像的多通道显微镜的开发。我们使用三目头将光路分为 6 个独立通道，并采用相机阵列进行并行数据采集，实现了约每秒 1 千兆像素的最大数据吞吐量。为了进行单帧快速自动对焦，我们在聚光镜的后焦面放置了两个近红外 LED，以两个不同的入射角照明样品。热镜用于将近红外光导向自动对焦相机。对于多平面全玻片成像，我们同时获取厚样品的 6 个不同焦平面。对于多光谱 WSI，我们将 6 个独立的像面中继到同一焦面位置，并同时获取 6 个光谱波段的信息。对于全玻片相位成像，我们同时获取 3 个焦面位置的图像，并使用强度传输方程恢复相位信息。我们还提供了一种开源设计，可将通道数从 6 个进一步增加到 15 个。所报道的平台为多重荧光成像和多模态 WSI 提供了一种简单的解决方案。在不进行 z 轴扫描的情况下获取瞬时焦堆栈，也可能实现对各种生物样品的快速 3D 动态追踪。